大家好:我是今天的主讲医师刘静;今天主讲的题目是——医学真菌检验技术。
医学真菌学检查是诊断真菌病的重要依据,随着真菌感染病例的日益增多,对实验室的诊断也提出了更高的要求。不论是患者浅部或深部的感染诊断,几乎全依赖于临床标本的真菌学检查。特别是系统性真菌感染,其早期特异的诊断是挽救患者生命的关键,而病人真正的形态结构十分多样在不同条件下同一真菌也可以有不同特定的形态。因此,在真菌的实验室检查中,必须熟练掌握各类真菌的形态特征以及在不同条件下的演变规律。才能获得对致病真菌的正确的诊断。目前真菌感染的实验室检查方法主要包括了:常规检查法和特殊检查法两类。常规主要包括1.形态学检查(直接镜检+染色镜检)2.培养检查3.组织病理学检查。
特殊检查主要包括了血清学方法和分子生物学方法。
就特殊检查的进行了如下阐述:
一、血清学方法
随着诊断技术的进展以免疫学方法检测真菌病已成为可能,引起深部真菌感染的病原菌主要有白念、曲霉菌以及隐球菌等。
传统的检测方法主要为血培养和组织活检,但血培养历时太长,且深部真菌感染的病原菌不易培养成功,阳性率较低。而深部真菌感染的临床征象错综复杂,又使得组织活检缺乏典型改变,影响正确诊断,这些都使得这些方法所起的作用极为有限,真菌的抗原抗体机代谢产物的血清学检查用于深部真菌感染的实验室检查,取得很好的效果。
目前常用的免疫诊断方法有
1.特异性抗原的检测:A乳胶凝集实验 B酶联免疫试验 C荧光免疫测定法
2.特异性抗体检测: 由于受检者多为免疫低下的患者,因其致阳性率低, 故现已少用。
二、分子生物学方法
近年来随着分子生物学的发展,已经有聚合酶链反应扩增、分子探针、限制性酶切片段长度多肽性分析、DNA指纹图谱、随机扩增颠DNA多肽性等方法。用于深部真菌病的诊断和分型研究,形成了以PCR技术为基础的一系列分子诊断方法。
从这些新技术对多种致病真菌鉴定的应用过程中发现,此类方法具有操作简便省时省力、特异性敏感性高的优点。特别是从分子水平对真菌从遗传进化角度阐明菌种间内在的分类学关系,真正达到人们追求已久的自然分类的目的。我们有理由相信随着pcR及相关技术在临床的应用及更广泛深入的研究,将会对真菌感染的诊断和鉴定产生根本的影响。
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