(一)标本的采集原则
1.早期采集细菌分离培养标本,尽量在发病早期及使用抗生素之前采集,以提高检出率。
2.严格无菌操作采集标本,避免标本被其他微生物所污染。
3.根据不同的感染病种及检验目的,确定采集不同病期患者的血液、脑脊液、咽拭子、粪便及尿液等标本。有时需采集急性期与恢复期双份血清,以检测抗体消长。
4.标本在采样后,做好标记并尽快冷藏送检,奈瑟氏菌标本需要室温下立即送检。
(二)检验程序
感染性疾病(infectious disease,简称感染病)的病原学检测,对于明确患者的临床诊断、选择有效的治疗措施、预防疾病继续传播与流行以及判断患者预后等,均十分重要。实验室病原学诊断方法可分为五类:①镜下直接观察,即对病原微生物进行革兰氏染色等着色后,借助于光学显微镜或电子显微镜观察病原微生物的形态结构。②病原微生物分离、培养和鉴定,是将标本接种于培养基,分离单一菌种后,进行形态学观察和生化试验鉴定等。此经典方法被作为金标准,但因其复杂、所需时间长及检出率低,目前临床实验室正在被自动化或半自动化细菌生化分析仪所替代。③病原微生物的抗原检测,包括酶免疫(EIA)、免疫荧光(IF)、放射免疫(RIA)及红细胞凝集等血清学试验。④分子生物学技术检测微生物特异性RNA或DNA片段,应用核酸杂交、聚合酶链反应(PCR)扩增及基因芯片技术等分子生物学方法,使病原学检测进入微量化、快速化、灵敏和特异化时代,并正在走向综合化,即通过一个基因芯片试验可分别检出多种病原体的核酸。⑤免疫学试验,检测宿主感染后免疫应答的抗体和细胞免疫指征。实验室病原学检测结果应结合患者的流行病学史、临床症状和体征及其他物理与化学检查结果,进行综合分析判断,作出感染病患者的病因诊断,这在机会性致病性微生物感染的诊断上尤应如此。
根据感染病的种类及标本采集的时机,有选择地应用上述病原学诊断方法。