UID
741362
�Ķ�Ȩ��
200
רҵ��
����
��ҽ��
�ʻ�
ע��ʱ��
2008-7-13
|
����ע�ᣬ�ύ������ѣ����ø���ܣ�����������ת������
����Ҫ��¼�ſ������ػ�鿴��û���ʺţ�ע��
x
��ͯ��к���IJ�ԭ�����ⷽ�� ԭ�� 2016 ����ѧ��鷿 ����Ŀ�� С����Ⱦ�Ը�к���IJ�ԭ��ҪΪ���������Ϊϸ�����������ĸ�к��Խ��ټ�,��ԭ����������ٴ���ϵ���Ҫ���ݡ�
�������� ��Pubmed�������ݿ���1990����2011���븹к��ԭ��ⷽ����ص������м�����عˣ��ܽ����ͯ��к����صIJ�ԭ�����ⷽ����
���½�չ ��к���IJ�ԭѧ��ⷽ�������羵����������������ѧ��������������ѧ�����ȡ����г�ʽ�ۺ�ø����Ӧ��PCR��������PCR��ʵʱӫ�ⶨ��PCR��⼼�������ڲ�����ⷽ���й㷺Ӧ�ã���ϸ��������ͼ������ⷽ��Ҳ��ʼӦ�ã��������ͬʱ��⼸��ϸ��������˼��������ʡ�����оƬ���������ڲ��ֲ�ԭѧ�о���
�ܽ� ��ԭѧ֤�����ٴ���ϵ���Ҫ���ݡ����ż�ⷽ���IJ��ϴ��£���ԭѧ���������Ҳ����ߡ�
����
С����к���Ƕ��Ƴ�����֮һ�����ɶ��ֲ�ԭ�����һ�ּ������䲡����ж��������ٴ���ԭѧ������Ч�����ۺ��жϡ����в�ԭѧ֤�����������ٴ���ϵ���Ҫ���ݡ���к��ԭѧ���о����ŶԼ�������ʶ�ͼ�⼼������߶��������롣���Ķ�����к�IJ�����ϸ��������Լ���������о�����������
����
�����Ƕ�ͯ��Ⱦ�Ը�к����Ҫ��ԭ�������ͯ��к�ij�������������״������rotavirus��RV�����˱�״������human calicivirus��HuCV������״������astroviou��ASV���������ٲ�����entericadenovirus��EADV���ȡ�
��״����
�ڲ�������ĸ�к���У�RV��ռ��λ�IJ���ȫ����ÿ����ΪRV��Ⱦ����Լ1.25��Ӥ����к��90��Ӥ��������1973��Ĵ�����Bishop���о�Ӥ������θ����ʱ���õ��������ڷ�����ҵ�RV���������ݲ������г���״��̬������1975��ò��������ʲ���������֯����ΪRV��RV���ں����²����ƣ���״���������������ڿǵ���VP6��ԭ�ԵIJ�ͬ�������ΪA��B��C��D��E��F��G�߸�Ⱥ��������ǽṹ����VP7�IJ�ͬ����Ѫ���ͣ���ΪG�ͣ�����ΪG1��G2��G3��G4�����������Ʊ����硣�����������ڸ��������Լ����������IJ�ͬʱ�ڶ��в�ͬ��A��RV��ȫ����ض�ͯθ������Ҫ��ԭ�壬����90%��3������Ӥ��������RV��Ⱦ����5�����¸�к�����У�RV���¸�кռ20%~70%[1,2]��
Ŀǰ���RV�ij��÷��������¼��֣�
�羵�������ļ�⼼������㡢��ݣ����豸����������������׳��ּ����Խ��[3]��
����������������������Ҫ��������������������ȵͣ���Ŀǰ��������A��RV���ʱ���������ϺͿ��е��������ޡ�
����ѧ��鼼���������ļ������Ϊ���߷��걾�е�RV��ԭ��������ѧ��鼼����������ø�������������飨ELISA�����÷��������������Ⱥ�����ȸߣ�������Ⱦ����������������ȷ�Ըߡ��� ELISA˫������ķ����ɸ��ݼ��Ŀ�IJ�ͬ����ư�������ͼ�⿹�壬������������Ѫ����͡�������������ڴ��ģ�ٴ��������в�ѧ���顣������ǿ���������߷������÷�����۵���������ʵʩ�������۹۲�������¼��Ҳ��ͨ������Ӧ���ɫ�ƶ�����������ˣ������ٴ���ʵ���ҹ㷺Ӧ�á����齺�������飺���ñ������RV���ŵ�������ײ������Բ�������Ҫ�ߣ��������谺����������豸��ֻ��2��3 min������жϽ������Ӧ���걾��ɸ��ͳ�������кܺõ�ʱЧ�ԣ������ڻ�����߲��ſ�չ����֮��RV������ѧ��ⷽ��������졢�ȶ������кܸߵ������Ⱥ�����ȣ������ܹ��������١�ȷ��������ϡ�
�����⼼��[4]���ٱ�ϩ����������Ӿ�����۱�ϩ����������Ӿ�������Ⱥ�����Ƚϸߣ����ڻ���ˮƽ�Ϸ�����ͬ��������ͬ����֬�ǵ�Ӿ���������٣�<3 h����������RV�Ŀ�����ϡ��ھۺ�ø����Ӧ��PCR�������������ȸ��ߣ��ɼ�ⴢ��ϳ�ʱ��ı걾������������������������������ڻ����о��������������ּ������糲ʽPCR������PCR��ʵʱӫ�ⶨ��PCR�ȡ��ۻ���оƬ������һ���ͻ�����ͨ�����Զ�����⼼����Ŀǰ�з���RV����оƬ�������ڶ���ķ��顢���ͼ��¶���ļ����Ȳ�ԭѧ�о�[5-7]��
�˱�״����
HuCV�������ͯ��ϸ���Ը�к����Ҫ��ԭ�壬����Ϊ������ŵ�粡����noroviru��NV�������粡����sapovirus��SV����1968������������ŵ�߿˵�һ��Сѧ�ڱ�������θ���ף�1972��Kapikian���õ羵���1968�꼱��θ���������걾ʱ������NV�������˱�״������ŵ�粡������ԭ�ʹ����ꡣ1975��Madeley��Cosgrove�õ羵���С�����걾ʱ����HuCV��1995���ҹ������1��NV��Ⱦ��������������ȾNV��Ļ������н��з������ɰ�NV��Ϊ3������Ⱥ����G��G���G�����������ֿɷ�Ϊ25�������ͺʹ�����Ⱥ���������Ͷ�α����ĸ�к��ԭ����з���������G�����ȺNV���ǵ�ǰ����ȫ��θ���ס���к����Ķ���[8]���й�����Ԥ���������ķ�������[9]�ռ����ҹ��������������ӱ���13������1999����2005��5�����¸�к�����ķ��걾4426�ݣ�����HuCV�ļ��������Ϊ19%����NVΪ����ռ96.7%��
���NV�ij��÷������£�
�羵�����羵������ֱ�ӵ羵�������ߵ羵���������豸���������ȵ͡�
���߷������߷������������߷���RIA���������ء��������߷���biotin-avidin immunoassay����ELISA��RIA���������ȸߣ��ɼ����������ߵ�ˮƽ������ʱ������Ҫʹ�÷�����ͬλ�ر�ǡ�Ϊ�˼�������������Ԥ���������ģ�CDC�������������ء��������߷�������������RIA���൱��Ŀǰ�ѳ�Ϊ����CDC���NV��ԭ�Ϳ���ı�ʵ�鷽����1992��Jiang�������״�������NV�¿ǵ��׳ɹ�������NVø������ⷽ�����п��١����������õ��ŵ㡣����֮��Ϊ���߷�Ӧ�����������̫�ߣ�Ӧ�÷�Χ��խ��
��������ѧ��ⷽ������ת¼���ۺ�ø����Ӧ��RT-PCR����������ȸߡ������ȸߣ��ܼ����͵�20~50�����IJ������ᣬ��Ŀǰ������������ļ�ⷽ�������꣬�о��߿�ʼӦ�õ��º�����������nuclieic acid sequence-based amplication��NASBA��ֱ������RNA���NV���˷������������Ե���RT-PCR������������ֻ��һ��RNA������������RT-PCR���ڵ�DNA������Ⱦ�������˲���ʱ�䣬�������ʵ�[10-12]��
��״����
ASV��1975���״���Appleton���ڼ���θ�������ķ�����õ羵�۲쵽��1976��Madeley���ݲ������γ����������״����������ΪASV��1981��Lee��Kurtz��������״������HAstV��������ϸ�������ʹ���������֤ʵ��ASV������Ӥ���������˼����߹��ܵ����߸�к����Ҫԭ��֮һ��HAstVΪ���¿ǵ�������RNA����������ASV�ơ�HAstV������7��Ѫ���͡���RVһ����ASV��Ⱦ�������Եļ����ԣ����´����������м���һ��Ϊ�����������ȴ����������м���Ϊ�꼾[13-15]��
ASV����Ϸ�����RV����״������һ��������һ���ɵ��������羵�۲쵽���ø�������ѧ��������������ѧ�������Ĺ��̣�����Ҫ��ⷽ�����£�
�羵�����羵�����жȵͣ��Ҳ������ڷ��͡�
���߷������߷���Ҫ�������ߵ羵����RIA������ӫ�ⷨ��QFA����ø���߷���EIA���ȣ������������Ի��������Կ���ɼ���ASV 8��Ѫ���ͣ�����ʹ�ò�ͬѪ���͵�������������̷��Ʊ������¿ǵ�����Ѫ�����в�ѧ�о���
��������ѧ�������ü�ⷽ�����Ϸ�չ������RT-PCR������ʵʱ��ת¼PCR��RT2-PCR��������оƬ�����Լ�����������������������1995��Noel��ͨ���Ա����¿ǵ�����ORF2������һ��384 bp���������������ͬѪ����HAstV������ͬ�ģ����ڲ�ͬѪ���͵Ķ�����Dz�ͬ�ģ��Ӵ��о��߿�ʼ��RT-PCR�ķ�����ASV���з��͡�Beuret��ʹ��RT2-PCR������ͬʱ���NV���ͣ�����������HAstV 3�ֲ��������ҽ����ʱ�����̵�3 h�����ң��˷������Լ��걾��ASV�IJ�������������RT2-PCR����ڴ�ͳ��RT-PCR������ŵ㣬����PCR��Ӧ��ɺ����辭��������Ӧ���ɽ��в��������ⶨ������ʵʱ���PCR���̣��ɼ���RT-PCR��Ӧ�е���Ⱦ�����жȸߵȡ�����оƬ������2008��Brown�ȸ��ݵ��������̬�ԣ�single nucleotide polymorphisms��SNP�����оƬ��˼·�����HAstV��8��Ѫ����ORFlb������Ƭ�εı��غ߱��������һϵ�г���Ϊ17���������̽�����ڻ�����͡�����������������������nucleic acid sequence based amplification��NASBA�����˷���RT-PCR����ʱ�̣����ᷢ��DNA��Ⱦ����Ҳ��������ԣ����һ�����������������л������Ͳ�ԭ���[16]��
�����ٲ���
EADV��20����80������ֵ�һ�ֵ���Ӥ����к������Ҫ��ԭ��EADV��Ⱦ��ȫ���Էֲ���������ؾ��б��档�������о���ʾ��EADV��Ⱦ���µ�Ӥ�����Ը�к�ķ�����Ϊ1.1%~12.0%[17-19]��50�������Rowe�����г��Ķ�ͯ����ϸ����������Է��������Բ����У��״η����ٲ�����1975��F1ewett���״�Ӧ�õ羵�������ڼ���θ����������з�����Ӥ��θ����ֱ����ص��ٲ�������Щ�ڵ羵�¹۲쵽�Ĵ�����ٲ������������ڳ���Ӧ�õ��ٲ���ϸ������ϵͳ����������Щ�ٲ�������ΪEADV��1981��Takiff���״���Graham 293ϸ������ɹ����ƶ��˶�EADV���о���1995������ܵ��״����ҹ��Ӹ�к��������з��뵽EADV��
���EADV�ij��÷����������¼��֣��ٵ羵�������ߵ羵������ϸ���������� ����ѧ������ELISA������Ⱥ����жȽϸߣ����ҿ��١����졢������㡣���߰ߵ㷨��DIA����ELISA��Ϊ����ݡ������������ƹ㣬�������ٲ����Ŀ�����ϼ����в�ѧ���飻�ܷ�������ѧ����������DNA�����ӽ����������Ӿ��PCR�ȡ�DNA�����ӽ���������EADV�ļ��ͷ��ͣ��÷�����ȸߣ����Ѹ�٣���DNA̽���Ʊ����̸��ӣ�����Ҫ��ߡ�PCR���������٣������Ⱥ�����Ⱦ��ϸߡ�ʵʱ����ӫ��PCR��real-time PCR����Ŀǰ���Ƚ��ļ�ⷽ�����ڴ�ͳPCR�Ļ����ϣ�ʹ����ӫ��̽�뼼��������˼����������Ⱥ����жȣ������ԶԼ�����ʽ����������÷�����������EADV�ļ��[20]�������п�ʹ�û���оƬ��������ͬʱ��������������о�������[21-23]��
���������о�����������ԭ��������������atomic force microscopy��AFM����������ѧ�����������ڲ���ѧ�о��е�Ӧ�ã����ǿɶԸ��ಡ�����ӳ��ṹ���Ĥ���ס�DNA/RNAʵ�־�ϸ�۲⣬�Բ�������������������вⶨ���Բ����²����ƽ����о��ȣ���ʹAFM��Ϊ����ѧ�о����ɻ�ȱ���ֶ�֮һ[24]������ӫ��RT-PCR��ⷽ���Ľ������ٴ�Ӧ��ʹͬʱ�����ָ�к������Ϊ����[25-27]��
ϸ��
ϸ���������ͯ��к����һ��Ҫ��ȾԴ�������ڲ��������ҹ��������ͯ��к����Ҫ�²����д˾���ɳ���Ͼ���־�ؾ���������ȣ����⣬�������ڶ�ͯ�У����θ˾����������ײ�����ͭ�̼ٵ�������Ҳ�б��档
��ʡһ�и�к������Э������1986ȫ������Ҫ��ԭ�����������ʾ�����ҹ�ũ�壬С����Ⱦ�Ը�к����Ҫ��ԭ����Ϊ������к�Դ˾����� RV����־�ؾ����� �ճ����������� ɳ�ž������ڳ���������ͬ������Ϊ���� RV������к�Դ˾�����־�ؾ����� ɳ�ž����� �������������ž��÷�չ����������ˮƽ��ߣ��䷢���������½��������²����ڼ��٣������²���������ӣ���ҩϸ��Ҳ�����ӡ���ǿ��ͨ��PCR����DNA��������Ӧ�ã���ͬʱ�������峡������Ӿ������������ͯ��к��ɳ�ž���ҩ�����ڹ������״η��������˺�ɳ�ž���blaCTX-M-55��������ɭɳ���Ͼ���blaDHA-1��AmpCø����ͨ����ͬ��⼼�������в�ԭ������Ϊ�ٴ����������ṩ����Ҫ����[28]��
���ϸ���ij��÷����������¼��֣�
�羵�������ø߱��������������;������ڹ۲����ȾɫͿƬϸ�����졣
ϸ�����������������걾������SS��McK��McS���������ϣ��۲�����γɡ�Ȼ���һ������������Ѫ��ѧ������
������Ӧ����������ԭ���������������ԣ��ɶԸ��೦����ԭ�����г���������
����Ѫ��ѧ���飺��õ���ELISA��������ڼ�⳦����ԭ���Ŀ�ԭ��������ĸ��ֶ��ء��������������ѱ��㷺Ӧ�á�
��������ѧ��ϣ�PCR�ǽ�ʮ������Ӧ�����ķ�������ѧ��鷽�������²����ļ���У��������Ŵ����ʸ߶ȱ��صĺ���������������������������������������Ӿ������������ǹ۲�������������У�����PCR��DNAָ��ͼ����������PCR��⼼����ӫ��PCR������оƬ����������PCR��⼼����Ӧ��Ҳ�൱�㷺�����������Ż���оƬ�����ķ�չ��ͨ������ͨ��оƬ����ƽ̨���ѿ��Խ������١�ȷ����ͨ������²����ķ���[29-35]��
�����������
���
����к�������Ҫ�������������ù����ëù�������߾���������ȣ���ɫ���������ij�����Ϊ�����������������ڹ������ء����ء��������Ƽ���������ҩ���Ӧ�ã����������Ⱦ�������࣬����������õļ�ⷽ���������¼��֣�
�� ֱ����������ͿƬȾɫ���죬���취�������ڼ�飬������Ⱦ�����Լ���������
�� ��������
�� Ѫ��ѧ��飬���Լ������Ŀ�ԭ����л����Ϳ��壬���жȺ�����ȸ�[36-38]��
�� ��������ѧ��ϣ��ü�鷽������PCR������оƬ������DNA ���з��������Ӻ����ӽ������ȣ����������ȸߣ������ʸ������������������������������׳��ּ����Խ�����ҶԼ�������Ҫ��ϸ�[39-45]��
������
��ͯ�������Ը�к�������IJ�ԭ�������װ�ԭ�桢���ϼֵڱ�ë�桢�����ӳ桢���ڵγ��С����ë�桢Ѫ���桢��֧غ���桢����ȡ����װ�ԭ���Ը�к�����ϼֵڱ�ë���Ը�к��Ӥ���г��������桢����Բ�߳漰Ѫ�����Ⱦ�ڽϴ�Ķ�ͯ���������н�Ϊ�����
���������������ӳ桢��ѿ��ԭ�桢Բ���ӳ��ڸ�Ⱦ�Ը�к�����õ��о����������ٴ���ע�����У������ӳ泦���ѳ�Ϊȫ��������к����֮һ��ռ�������Ը�к������λ���2 λ����ѿ��ԭ����С��������Ҫ���²������棬��С��Ǩ���Ը�к����Ҫ����
���ڼ����棬���õļ�ⷽ��������
�� ��ԭѧ��飬��㾵���ֱ���Ĥ����֯��飻
�� ����ѧ��ϣ���������ȼ����жȸߣ���鷽�������÷�����Ƥ�����顢ELISA�����߽��Ǽ����ȣ�
�� ��������ѧ��������Ҫ��������̽�롢PCR������оƬ����[46-50]��
��
С����Ⱦ�Ը�к����ԭ��ҪΪ���������Ϊϸ�������������ĸ�к��Խ��ټ�������С����Ⱦ�Ը�к�����õIJ�ԭѧ��ⷽ�������羵����������������ѧ��������������ѧ�����ȡ���ԭѧ֤�����ٴ���ϵ���Ҫ���ݡ����ż�ⷽ���IJ��ϴ��£���ԭѧ���������Ҳ����ߡ�ͨ����ͬ��⼼�������в�ԭ��������Ϊ�ٴ����������ṩ��Ҫ���ݡ�
|
�յ�1��
|